Técnicas de Edición de Ácidos Nucleicos en IVU

-Tema: Edición multigénica en el genoma de Escherichia coli a través del sistema CRISPR-Cas9
-Tipo de Edición:in vivo de celulas somaticas  

-Dirigido hacia: Gen KanR, gen de la recombinasa λ-Roj, gen Cas9

-Dirigido por: CRISPR-Cas9

-Órgano a tratar: Órganos del Tracto urinario 
-Vía de administración: Insercion heterologa del gen de resistencia 
-Resultados: 
Largo plazo: Se han reportado efectos fuera del objetivo de Cas9 en células humanas y murinas
Mediano plazo: la eficiencia disminuyó drásticamente. Esto se debió a que la eficiencia de la recombinación mediada por λ-rojo de doble cadena no era suficientemente alta, o la eficiencia de transformación del ADNds en E. coli era baja.
Corto plazo:  El sgRNA dirigido a los loci de genoma de interés ubicados en la serie pTarget se expresó a partir de un promotor constitutivo mínimo con un origen de replicación pMB1

Referencias Bibliográficas:
1. Li J e. Coupling ssDNA recombineering with CRISPR-Cas9 for Escherichia coli DnaG mutations. - PubMed - NCBI [Internet]. Ncbi.nlm.nih.gov. 2019 [cited 6 January 2020]. Available from:https://aem.asm.org/content/81/7/2506.full