Terapia Epigenética en IVU´s

Tema:  El efecto antivirulencia de las proantocianinas del compuesto activo de arándano (PAC) en la expresión de genes de E. coli CTX-M-15 resistente a cefalosporinas de 3era generación asociada con infecciones del tracto urinario
Mecanismo Epigenético Tratado: Se ha propuesto el consumo de jugo de arándanos y las pastillas Cysticlean, para prevenir y tratar IVU´s causadas por E. coli; el mecanismo de acción va a radicar en el efecto que ejercen las proantociadinas, especialmente las de tipo A en el urotelio, que evitan que la bacteria se una por medio de las adhesinas fimbriales (por medio de la metilación de los genes de virulencia chuA, fimH, fimA, PapG, CsgA, entre otros, como las proteínas SoxS, KPSM, TraT y RecA); ejerciendo así una acción antibacteriana.
¿Cómo se lo hizo?: Se analizó mediante qRT-PCR a la cepa de E. coli restsitente a la cefalosporina NCTC1553  para la expresión de factores de virulencia después del tratamiento con Cysticlean y el jugo de arándanos, se detectó los determinantes de virulencia que codifican las toxinas SAT  y USP, el sistema de adquisición de hierro ChuA, las proteínas SoxS, KPSM, TraT y RecA, el gen de resistencia a los antibióticos CTX-M, y transportadores IdfB y HcaT.
Resultados: El uso de estos productos redujo signficativamente la expresión de los genes seleccionados que codifican factores de virulencia y B-lactamasas, representando una alternativa práctica en cuánto a la prevención de IVU´s causadas por E. coli resistente a antibacterianos

Bibliografías:

1. Reid R. The anti-virulence effect of cranberry active compound proanthocyanins (PACs) on expression of genes in the third-generation cephalosporin-resistant Escherichia coli CTX-M-15 associated with urinary tract infection [Internet]. Sci-hub.tw. 2019 [cited 13 January 2020]. Available from: https://aricjournal.biomedcentral.com/articles/10.1186/s13756-019-0637-9

Técnicas de Edición de Ácidos Nucleicos en IVU

-Tema: Edición multigénica en el genoma de Escherichia coli a través del sistema CRISPR-Cas9
-Tipo de Edición:in vivo de celulas somaticas  

-Dirigido hacia: Gen KanR, gen de la recombinasa λ-Roj, gen Cas9

-Dirigido por: CRISPR-Cas9

-Órgano a tratar: Órganos del Tracto urinario 
-Vía de administración: Insercion heterologa del gen de resistencia 
-Resultados: 
Largo plazo: Se han reportado efectos fuera del objetivo de Cas9 en células humanas y murinas
Mediano plazo: la eficiencia disminuyó drásticamente. Esto se debió a que la eficiencia de la recombinación mediada por λ-rojo de doble cadena no era suficientemente alta, o la eficiencia de transformación del ADNds en E. coli era baja.
Corto plazo:  El sgRNA dirigido a los loci de genoma de interés ubicados en la serie pTarget se expresó a partir de un promotor constitutivo mínimo con un origen de replicación pMB1

Referencias Bibliográficas:
1. Li J e. Coupling ssDNA recombineering with CRISPR-Cas9 for Escherichia coli DnaG mutations. - PubMed - NCBI [Internet]. Ncbi.nlm.nih.gov. 2019 [cited 6 January 2020]. Available from:https://aem.asm.org/content/81/7/2506.full